PRZEMYSŁ GORZELINICZY
Ćwiczenie 10
Temat:
Fermentacja alkoholowa. Porównanie efektywności różnych szczepów drożdży
Zagadnienia teoretyczne:
q komórka eukariotyczna i jej elementy składowe
q charakterystyka drożdży Saccharomyces cerevisiae
q przebieg fermentacji alkoholowej (z uwzględnieniem enzymów pierwszego i ostatniego etapu procesu.
Część praktyczna:
Materiały:
Ø sok winogronowy
Ø sacharoza
Ø różne szczepy drożdży
Ø fosforan amonu
Ø kolby z rurkami fermentacyjnymi
Ø parafina
Ø szkiełka podstawowe i nakrywkowe
Ø błękit metylenowy
Ø płyn Lugola
Ø waga laboratoryjna
Procedura:
Obserwacja mikroskopowa komórek drożdży:
Badanie żywotności drożdży:
q Na szkiełko podstawowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży, a następnie dodać kroplę roztworu błękitu metylenowego. Przykryć szkiełkiem nakrywkowym i obserwować pod mikroskopem. Komórki martwe barwią się na niebiesko, natomiast żywe pozostają niezabarwione – widoczne są ich kontury.
Badanie obecności glikogenu w komórkach drożdży:
q Na szkiełko podstawowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży, a następnie dodać kroplę płynu Lugola. Przykryć szkiełkiem nakrywkowym i obserwować pod mikroskopem. Komórki zawierające glikogen barwią się na kolor ciemnobrunatny, natomiast pozostałe na jasnożółty.
Założenie hodowli fermentacyjnej:
q Do kolby o pojemności 250 lub 500 cm3 wprowadzić 150 cm3 soku winogronowego, do drugiej 20% roztwór sacharozy (roztwór należy przygotowywać samemu), 5cm3 hodowli drożdży Saccharomyces cerevisiae, lub 0,5g liofilizatu drożdży, oraz 0,2g fosforanu amonu.
q Kolbę zamknąć korkiem z waty z rurką fermentacyjną i zaparafinować. Rurkę wypełnić wodą, następnie sprawdzić szczelność układu.
q Kolbę zważyć i zapisać masę.
q Podpisany układ (grupa, sekcja, data nastawienia układu) odstawić w miejsce wskazane przez prowadzącego na dwa tygodnie (temp. 20-30°C).
LITERATURA ŹRÓDŁOWA:
1. CHMIEL A.: „Biotechnologia – podstawy mikrobiologiczne i biochemiczne” – Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa, 1998
2. RÓŻALSKI A.: „Ćwiczenia z mikrobiologii ogólnej” – Wydawnictwo Uniwersytetu Łódzkiego, Łódź, 1996
3. SCHLEGEL G. H.: „Mikrobiologia ogólna” – Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa 2003
Kasiaaa_aaa