Testy diagnostyczne
Ø różnicujące: dystrofia mięśniowa a niektóre zaburzenia neurologiczne, pląsawica Huntingtona a niektóre zaburzenia neurologiczne;
Ø poszukiwanie nosicieli w rodzinie (np. CF);
Ø poszukiwanie nosicieli w populacji (diagnostyka przesiewowa);
Ø testy prenatalne;
Ø diagnoza przed wystąpieniem symptomów choroby (pląsawica Huntingtona, choroba Alzheimer’a, dziedziczny rak piersi, rodzinna polipowatość jelit)
Receptor androgenowy
v wewnątrzkomórkowy receptor o funkcji czynnika transkrypcyjnego
v gen 75-90 kpz, Xq11-12, 8 egzonów oddzielonych przez 26kb introny
v białko: N-koniec funkcja modulacyjna, centrum: przyłączanie DNA, C-koniec przyłączanie ligandu
v gen od 3’ końca zawiera ok. 21 ± 2 powtórzenia tripletu CAG (terminalny) - u zdrowego człowieka zawiera od 11 – 14 – 35 nukleotydów; wysoce polimorficzny,
v 90% kobiet jest heterozygotami (między dwoma allelami może być aż 20 nukleotydów różnicy);
v średnio u ludzi rasy białej 21 powtórzeń, czarnej 18.
v zespół Kennedy’ego (rdzeniowo-opuszkowa atrofia mięśni) – (mutacja dynamiczna)
v niepełna/pełna niewrażliwość na androgeny (PAIS/MAIS (46,XY)/CAIS (mutacje punktowe/delecje)
v rak prostaty (mutacje punktowe)
• VNTR (variable number of tandem repeats);
• krótkie, identyczne segmenty DNA połączone „głowa-ogon” powtarzalne w ludzkim genomie;
• liczba i locus powtórzeń różne u różnych osób;
• pojedyncze locus lub liczne loci;
• typowanie nosicieli w rodzinie.
Southern blotting
v izolacja DNA
v elektroforeza DNA na żelu poliakrylamidowym – rozdział co do wielkości
v transfer na membranę nitrocelulozową
v hybrydyzacja z radioaktywną sondą DNA (32P)
Northern Blotting
v izolacja RNA
v elektroforeza RNA na żelu poliakrylamidowym – rozdział co do wielkości
v hybrydyzacja z radioaktywną sondą DNA lub RNA (32P)
Western Blotting
v izolacja białka (wstępna)
v elektroforeza na żelu poliakrylamidowym – rozdział co do wielkości
v hybrydyzacja ze znakowanym przeciwciałem
karola.lenarczyk