_ćwiczenieII.pdf

(962 KB) Pobierz

Slajd 1

Projekt współfinansowany ze środków Unii Europejskiej w ramach Europejskiego Funduszu Społecznego

„Wzbogacenie oferty edukacyjnej na studiach stacjonarnych II stopnia kierunku biotechnologia” - projekt

realizowany przez Wydział Biologii i Nauk o Ziemi UMK w Toruniu

w ramach Priorytetu IV POKL 2007-2013, Poddziałanie 4.1.2

Transformacja szczepukarmiącegoHT115plazmidowym

DNA do wyciszenia genu kolagenu u C. elegans

Agnieszka Mierek-Adamska

ZakładGenetyki

306106355.017.png

306106355.018.png

306106355.019.png

306106355.020.png

306106355.001.png

306106355.002.png

306106355.003.png

POPRZEDNIEWIZENI

L4440

dpy-10

elektroporacja

komórekDH5α

L4440

Któreztychkoloniibakteryjnychposiadająwektorze

wstawką(genem dpy-10 C. elegans )?

306106355.004.png

Identyfikacjakoloniibakteryjnejnioącejplazmidzewtawką,anieputyplazmid

PCR KOLONIJNY

L4440

wynik pozytywny

dpy-10

paratarterówpecyficznych

do wektora L4440

L4440

wynik negatywny

306106355.005.png

306106355.006.png

306106355.007.png

306106355.008.png

LIZA ALKALICZNA

nocnahodowlakomórekDH5α,uktórych

wczeniejpotwierdzonoobecnodplazmidu

zewtawką

osad bakterii

L4440

osad zawieszony w buforze

zglukozą,Trisem i EDTA

dpy-10

wymywanie DNA plazmidowego

liza buforem z SDS i NaOH

wiązanieDNplazmidowegodozłoża

krzemionkowego i odpłukaniezanieczyzczeo

renaturacja buforem z kwasem octowym

306106355.009.png

306106355.010.png

ELEKTROPORJSZZEPUKRMIĄEGOHT115

inkubacja na lodzie

nałożenienakuwety

do elektroporacji

plazmid

komórkikompetentne

wykonanie

elektroporacji

wyianienapłytkizpożywką

LBzampicyliną

inkubacja z SOC 3h

37°Czwytrząaniem

306106355.011.png

306106355.012.png

306106355.013.png

306106355.014.png

306106355.015.png

306106355.016.png

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Numer indeksu.doc (41 KB)
cwiczenie5.pdf (2296 KB)
cwiczenie 4.pdf (581 KB)
cwiczenie 3.pdf (304 KB)
_ćwiczenieII.pdf (962 KB)

Inne foldery tego chomika:

Zgłoś jeśli naruszono regulamin